Реакция борде-жангу гонорея

Борде — Жангу реакция

Борде — Жангу реакция (реакция связывания комплемента, РСК) — это иммунологическая реакция, основанная на свойстве комплекса «антиген — антитело» фиксировать свободный комплемент. РСК протекает в две фазы: 1) адсорбция антител на антигенах; 2) выражение реакции в присутствии гемолитической системы (гемолиз).

Для постановки РСК изучаемые объекты (антитела и антигены) помещают в условия, обеспечивающие их взаимодействие в присутствии комплемента; затем к анализируемой иммунной системе добавляют «индикатор» — гемолитическую систему. Если комплемент фиксировался иммунной системой, гемолиза не происходит (положительная РСК; рис., а); если же иммунная система не фиксировала комплемент и ее компоненты не соответствуют друг другу, гемолиз происходит (отрицательная РСК; рис., б). Ингредиенты реакции: 1) испытуемая сыворотка, инактивированная прогревом в течение 30 мин. при t° 56°; 2) антиген (взвеси бактерий, экстракты органов и тканей, вирусы); 3) комплемент (свежая сыворотка морской свинки); 4) гемолитическая система (сенсибилизированные эритроциты барана, инкубированные с гемолитической сывороткой в течение 30 мин. при t° 37°). Для разведения ингредиентов используют изотонический раствор хлорида натрия. Первый этап РСК продолжается 60 мин. при t° 37° или 18—20 час. при t° 4—6° (более чувствительная РСК), второй этап — 60 мин. при t° 37°.

В диагностической практике и судебной медицине используют различные модификации РСК — качественные и количественные. См. также Вассермана реакция, Серологические исследования.


Схема реакции связывания комплемента: а — положительная; б — отрицательная. 1 — комплемент; 2 — сыворотка больного; 3 — сыворотка здорового; 4 — антиген; 5 — гемолитическая сыворотка; 6 — эритроциты барана.

Борде — Жангу реакция [J. Bordet, О. Gengou; синоним: реакция отклонения комплемента, реакция фиксации алексина (комплемента), реакция связывания комплемента (РСК)] — иммунологическая реакция, основанная на свойстве комплекса антиген — антитело фиксировать свободный комплемент. РСК протекает в 2 фазы: 1) адсорбция антител на антигенах, 2) выражение реакции (бактериолиз или гемолиз), для которого необходимо присутствие комплемента. Зависимость бактериолитических реакций от присутствия комплемента позволяет выявить взаимодействие антител с антигенами в реакции Борде — Жангу. Показателем соответствия антител в этой реакции служит фиксирование комплемента соответствующими иммунными системами, выявляемое добавлением к реакционной смеси «индикаторной» гемолитической системы.

Реакция Борде — Жангу осуществляется в два этапа: сначала изучаемые антигены и антитела помещают в условия, обеспечивающие их взаимодействие в присутствии комплемента, а после завершения адсорбции к анализируемой иммунной системе добавляется гемолитическая система (гемолизин + + эритроциты). При соответствии антигенов и антител происходит их взаимодействие и присутствующий в реагирующей смеси комплемент фиксируется иммунной системой. В этом случае при добавлении индикаторной системы гемолиза не происходит ввиду отсутствия комплемента (реакция положительная). Если анализируемые антитела не адсорбируются на антигенах, то комплемент в реагирующей смеси остается свободным и при добавлении гемолитической системы осуществляется гемолиз (реакция отрицательная).

Принцип разработанного Борде и Жангу метода серологического анализа лег в основу многочисленных модификаций реакции, используемой в диагностической практике и научно-исследовательской работе.

Обычная РСК, при которой регистрируется 100% лизис эритроцитов, предусматривает необходимость предварительного титрования комплемента; последний добавляется к иммунной системе в дозе, не превышающей необходимой для гемолитической реакции. Схемы постановки реакции определяются ее целью. В опыте могут испытываться различные дозы антигена при постоянном содержании сыворотки и комплемента, различные разведения сыворотки при постоянных дозах антигена и комплемента и т. д. Ингредиентами реакции являются: 1) испытуемая сыворотка, прогретая в течение 30 мин. при 56° с целью инактивации присутствующего в ней комплемента; 2) антигены (в качестве которых используют суспензии бактерий, экстрагированные из них белки, полисахариды и др.), экстракты из клеток растений и животных, вирусы и т. д., 3) комплемент — свежая сыворотка морских свинок, 4) гемолитическая система (сенсибилизированные бараньи эритроциты) — 5% суспензия эритроцитов, контактировавших с гемолитической сывороткой в течение 30 мин. при t° 37°.

Для разведения ингредиентов используют физиологический раствор NaCl. Антикомплементарность отдельных ингредиентов испытывается в контрольных пробах. Первый этап реакции (адсорбция антител) осуществляется при t° 37° в течение 60 мин. либо при 4—6° в течение 18— 20 час. (РСК на холоде). В последнем случае происходит более полная фиксация комплемента, что увеличивает чувствительность метода. На втором этапе реакционные смеси выдерживают при t° 37°. Результат регистрируют в момент 100% гемолиза в контрольных пробах.

В диагностической практике используют активные, а также «непрямые» методы реакции связывания комплемента, являющиеся модификациями реакции Борде — Жангу. В первых из них показателем реакции служит изменение содержания комплемента в испытуемой сыворотке. Вторые основаны на том, что при некоторых заболеваниях сыворотки не содержат комплементсвязывающих антител, но способны предотвращать реакции с сыворотками, обладающими комплементсвязывающей активностью.

Наибольшая чувствительность и точность присуща количественной РСК, в которой регистрируют гемолиз в зоне частичного лизиса. Чувствительность данной модификации реакции Борде — Жангу обусловлена тем, что в средней зоне лизиса (20—80%) отношение количества комплемента к количеству лизируемых эритроцитов имеет линейный характер. В основе этой реакции лежит специальный метод титрования комплемента, количество которого выражается в 50% единицах (СH50) и подсчитывается на основе уравнения Крога, представляющего ход гемолиза в зоне частичного лизиса. Согласно уравнению, где x — количество взятого комплемента, y — степень гемолиза, выраженная как часть единицы, k — доза комплемента, дающая 50% лизис, а показатель 1/n выражает степень наклона гемолитической кривой.

Степень гемолиза устанавливается при помощи спектрофотометра или фотоэлектроколориметра.

Количественная РСК в свою очередь имеет ряд модификаций. В частности, микрометод обеспечивает большую точность определений при малом расходе ингредиентов.

Использованные источники: www.medical-enc.ru

СТАТЬИ ПО ТЕМЕ:

  Внешние признаки гонореи у мужчин

  Через какое время проявляется гонорея

  Свечи вагинальные от гонореи

Методы лабораторной диагностики гонореи

Гонорея — заболевание, вызываемое бактериями-диплококками рода Нейссерий (гонококками). Может протекать бессимптомно, однако чаще проявляется болью при мочеиспускании у женщин и мужчин, тяжестью внизу живота, набуханием паховых лимфоузлов. Для диагностики заболевания используют серологические, бактериологические методы, а также реакцию для обнаружения генома бактерии, вызывающей триппер.

Диагностика

Какие существуют тесты для выявления гонореи? Диагностика триппера осуществляется при помощи следующих лабораторных исследований:

  1. Полимеразно-цепная реакция (ПЦР) мочи, мазка из влагалища и шейки матки, уретры, прямой кишки.
  2. Лигазная цепная реакция (ЛЦР) выделений.
  3. Культуральный метод после взятия мазка.
  4. Бактериоскопия с окрашиванием по Граму.
  5. Реакция Борде-Жангу (реакция связывания комплемента).
  6. Иммуноферментный анализ.

Для бактериоскопии, культурального метода и полимеразной реакции берут мазок из органов, пораженных гонорейным воспалением. Мазок из влагалища и уретры болезненный и может вызвать реакцию на боль в виде побледнения лица или обморока. Эти проявления не являются опасными.

Бактериологические методы включают в себя окраску биологического материала (мазка или мочи) по Граму, т. е. бактериоскопию, а также культуральный метод. Для бактериоскопии берется биологический материал — мазок на гонорею из уретры, канала шейки матки, влагалища, а также первая порция мочи. При поражении бактериями горла и миндалин, прямой кишки берется мазок и из этих органов.

Запрещено использовать антисептики и дезодоранты для половых органов за 24 часа до взятия материала. Женщинам подмываться и спринцеваться перед тем, как сдавать анализ на гонорею также нельзя.

В несколько этапов биоматериал окрашивается фиолетовым и красным красителями, после чего окраска фиксируется. Лаборант под микроскопом выявляет наличие раздвоенных бактерий, похожих на кофейные зерна — это и есть гонококки. Нейссерии при окрашивании по Граму приобретают красный цвет, являясь грамотрицательными бактериями.

Метод бактериоскопии быстрый, однако не всегда достоверный — если гонококки не обнаружены, то это не означает отсутствия триппера. Зато при нахождении красных диплококков сразу понятно — пациент заражен гонореей.

Культуральный метод заключается во взятии мазка и культивировании бактерий из него на различных питательных средах с содержанием альбумина — белка сыворотки крови. При помощи термостата поддерживается постоянная температура, благоприятная для гонококков. Среды защищают от действия солнечных лучей и высушивания. Метод используется как для диагностики, так для определения эффективности антибиотиков против нейссерий. Этот способ диагностики занимает около недели.

ПЦР и ЛЦР — анализы на гонорею для нахождения в биологическом материале генов гонококков. Обладают высокой точностью, нахождение генома нейссерий означает 100% заражение гонореей. Методы полимеразной и лигазной цепной реакций быстры и информативны, хоть и требуют специального оборудования. Лигазная реакция проводится не во всех лабораториях. Для проведения анализа берут мазок на гонорею из уретры, канала шейки матки и других органов, пораженных воспалением.

Отрицательная полимеразно-цепная реакция на гонококк еще не означает, что гонореи нет. При положительных серологических тестах на антитела к нейссериям выполняют провокацию, о чем написано ниже, и повторяют тесты.

К серологическим методам относят реакцию связывания комплемента (Борде-Жангу) и иммуноферментный анализ. Реакция связывания комплемента (реакция Борде-Жангу) проводится для выявления наличия антител в сыворотке пациента с подозрением на триппер. Применяется при подозрении на хроническую инфекцию нейссериями.

Иммуноферментный анализ (ИФА) выявляет также антитела к гонококкам. Антигены возбудителя триппера фиксированы на сорбенте. Антитела сыворотки больного гонореей связываются с антигенами, образуя комплекс, обнаруживаемый с помощью фермента.

В аптеках продаются тесты для обнаружения гонореи в домашних условиях. Однако этот метод не заменяет исследования в медицинском учреждении. Этот способ не обладает достаточной достоверностью и точностью.

Провокация

Если при бактериоскопии и культуральном методе возбудитель не найден, но серологические методы показывают наличие антител, то проводится провокация. Этот метод необходим для выведения гонококков из слизистых оболочек мочеполовых органов в их просвет. Также провокация проводится для оценки эффективности лечения. Химическое провоцирование заключается в обработке уретры и влагалища раствором нитрата серебра.

Биологический метод применяют у женщин — бактериоскопию мазка проводят при первой же менструации. Иммунная провокация проводится при помощи Гоновакцины, содержащей инактивированных нейссерий. Иногда применяется Пирогенал.

Через несколько дней после провокации берут мазок на гонорею и окрашивают его по Граму. Также берут мазок для культурального метода и полимеразной реакции.

Заключение

При наблюдении у себя симптомов гонореи не занимайтесь самолечением — обратитесь к венерологу для подтверждения диагноза. Гонорея может протекать как самостоятельно, так и в составе смешанных половых инфекций.

Использованные источники: veneradoc.ru

СТАТЬИ ПО ТЕМЕ:

  Нормы лейкоцитов в мазках на гонорею

  Лечить гонорею мужчин

  Гонорея сифилис хламидиоз симптомы

Общая диагностика женской гонореи

Цито-бактериоскопический метод . Гонорейное поражение мужских и женских половых органов распознается главным образом путем микроскопического исследования выделений из желез преддверия, уретры, цервикального канала. Нахождение в этих секретах гонококков подтверждает гонорейный характер данного заболевания. Несмотря на многие недостатки, бактериоскопический метод остается до настоящего времени основным методом диагностики гонореи. Остальные методы следует считать дополнительными.

К важнейшим недостаткам бактериоскопического метода следует отнести то, что не всегда удается обнаружить гонококки даже при повторном исследовании и в особенности в хронических случаях, а также трудность дифференцирования гонококков от другой бактериальной флоры. В. И. Константинов и А. С. Жарковская обнаружили гонококки при хронической гонорее у 20-30% женщин, Е. П. Майзель — у 40%, А. И. Петченко — у 31%. Бактериоскопический метод требует повторных исследований; однократное бактериоскопическое исследование при хронической гонорее обнаруживает гонококки лишь в незначительном проценте случаев. Чем длительнее заболевание, тем меньше шансов найти гонококки без применения провокации не только в первичном мазке, но и в последующих.

Если бактериоскопически гонококки обнаружены, то диагноз ясен. Если же они не найдены, то возможность гонореи все же не исключена; в этих случаях необходимо обратить внимание на атипичные формы гонококков. Крайне важно также обратить внимание на характер отделяемого (гной, слизь, серозная жидкость) и особенно на количество в нем форменных элементов (лейкоциты, плоские клетки) и отношение микрофлоры к лейкоцитам.

По Г. А. Бакшту и А. И. Петченко, различают три основных цито-бактериоскопических картины гонореи.

Картина первая. Большое количество сегментированных лейкоцитов (экссудат) при отсутствии посторонней флоры, гонококки расположены внутри или внеклеточно.

Картина вторая. Та же цитологическая картина, но без гонококков. Посторонняя флора отсутствует. Эта картина обнаруживается весьма часто при хронической гонорее и может перейти в первую после провокации. Таким образом, лейкоцитоз без посторонней флоры может считаться картиной, подозрительной на гонорею.

Картина третья. Небольшое количество бесструктурных лейкоцитов в состоянии некробиоза. Обилие посторонней флоры. Появление посторонней флоры следует считать переломом в сторону улучшения при лечении; первыми после гонококка появляются кокковые формы, за ними — грамдиплококки, коккобациллы, палочковидные формы; появление палочковидных форм свидетельствует о начале выздоровления и в большинстве случаев исключает наличие гонококков.

Существует непрерывная динамика изменений картин мазков под влиянием лечения и даже времени.

Бактериологическое исследование . Бактериологический метод диагностики, наиболее доказательный и точный, на практике не получил большого распространения из-за своей сложности и длительности. Большинство авторов считает, что для распознавания гонореи достаточно бактериоскопического исследования.

В связи с развитием учения о сульфаниламидорезистентных формах гонореи методу бактериологических посевов вновь стали придавать большое значение. По Хагерману (Hagermann), гонорея, перешедшая в латентную фазу в результате неполноценной сульфаниламидотерапии, может долго не обнаруживаться бактериоскопически, и только методом посева можно выявить гонококки.

Реакция связывания комплемента по Борде-Жангу . Борде вместе с Жангу разработали технику реакции фиксации комплемента при гонорее.

По концепции В. Е. Дембской, реакция Борде-Жангу не является показателем инфекции, а указывает на сенсибилизацию организма данным инфекционным агентом.

Для постановки реакции Борде-Жангу берут из кубитальной вены в пробирку 5-6 мл крови. В последние годы предлагают пользоваться небольшим количеством крови, полученной из укола шейки матки. Если необходимо переслать кровь на далекое расстояние (в участковой практике), можно пользоваться высушенной сывороткой. Для этого кровь оставляют при комнатной температуре на три часа. После образования свертка его отделяют от стенок пробирки стеклянной палочкой, пробирку же переносят в прохладное место. На следующий день на листок вощаной бумаги размером 6-8 см наливают 0,5 мл сыворотки и дают ей просохнуть в течение суток, предохраняя от солнечного света и пыли. Бумажку с высохшей (в виде стекловидной пленки) сывороткой свертывают подобно аптекарскому порошку и пересылают в лабораторию. Срок годности высушенной сыворотки 10-15 дней.

Большинство авторов признает, что при гонорее нижнего отдела гениталий у женщин реакция Борде-Жангу дает положительный результат лишь в 5-20%. При гонорее верхних отделов эта реакция в большинстве случаев (от 40 до 100%) выпадает положительно. При пиосальпинксах и аднекситах реакция более выражена; при периметритах, периаднекситах и эндометритах — меньше. Лишь в тех случаях гонореи, когда имеются осумкованные очаги в бартолиниевой железе, уретре, цервикальном канале, реакция Борде-Жангу выпадает положительно. Отсюда можно сделать вывод, что результаты реакции зависят не от наличия гонококков в выделениях, а от клинического проявления заболевания, причем глубоко гнездящиеся очаги поражения, обильно омываемые кровью и лимфой, обычно вызывают положительную реакцию.

Реакция Борде-Жангу очень ценна для установления этиологии аднекситов и артритов неясного происхождения. Но она теряет свое значение, если проводилось длительное лечение гоновакциной. Введение гоновакцины здоровым людям вызывает положительную реакцию Борде-Жангу, длящуюся от 1 до 3 месяцев. О сроке наступления положительной реакции после заражения авторы дают различные данные, колеблющиеся между четырьмя днями и шестью неделями; средним сроком следует считать две недели. Относительно времени исчезновения положительной реакции Борде-Жангу после выздоровления нет единого мнения.

В. Е. Дембская, считая эту реакцию показателем аллергических сдвигов в организме, допускает, что она может иметь прогностическое значение (больные, у которых отмечается отрицательная реакция, резистентны к стрептоциду), но отрицает пригодность этой реакции в качестве критерия излеченности.

Реакция Лисовской . Основываясь на работах Дебре и Параф, предложивших определение туберкулезного антигена в моче для диагностики туберкулеза мочевых путей, С. Н. Лисовская предложила применять этот метод для определения гонококкового антигена в моче больных, подозрительных на гонорею. Методика реакции Лисовской заключается в следующем: к испытуемой моче прибавляют противогонококковую сыворотку и комплемент; если в моче содержится гонококковый антиген, то получается отклонение комплемента, при добавлении гемолитической системы гемолиз не наступает. Другие авторы, а также и мы, считают этот метод малоудовлетворительным, так как в 30% случаев наблюдалось несовпадение реакции с результатами клинического исследования.

Реакция Фейгеля . И. И. Фейгель для диагностики женской гонореи, в особенности хронических или латентных форм, предложил реакцию на антиген с выделениями из цервикального канала.

Сущность реакции состоит в том, что с выделениями из цервикального канала ставится реакция отклонения комплемента; это — реакция Борде-Жангу только в обратном порядке: цервикальные выделения служат антигеном, а в качестве антитела берут сыворотку животного, иммунизированного культурой гонококков.

Техника получения материала: на шейку матки на 12-24 часа одевают колпачок Кафки, после чего колпачок с выделениями помещают в стерильную посуду и отправляют в лабораторию для приготовления из выделений антигена. Результаты реакции, по данным Фейгеля, положительные в 80-91,2%. По этому же автору, реакция становится отрицательной после излечения (через 2-4 месяца); таким образом, она имеет значение для критерия излеченности. Ценность реакции для диагностики латентной гонореи подтверждена рядом авторов.

Вакцинодиагностика . Введение гоновакцины — один из старых методов диагностики гонореи. И. Г. Бурлаков, А. Э. Мандельштам, А. И. Петченко, С. М. Беккер считают кожную реакцию весьма ценной для диагностики; по Бурлакову, кожная реакция дает правильный ответ в 70%, по Беккеру — в 75%, по Мандельштаму — в 70-90% и по Петченко — в 97% случаев гонореи.

Кожная реакция подтверждает наличие гонорейного процесса, не показывая активности его; она читается через 48 часов, в первые же сутки считается неспецифической. Реакция остается на некоторое время и по прекращении заболевания.

Выгодно пользоваться высокими титрами (2 млрд. микробных тел в 1 мл); впрыскивают 0,1 мл гоновакцины в верхне-наружную часть бедра. Реакция читается так: 1) краснота около 1 см в диаметре с заметной инфильтрацией — слабоположительная ( + ); 2) резкая краснота более 1 см в диаметре с ясно ограниченной инфильтрацией — положительная ( + + ); 3) те же явления, но при наблюдении через 72 часа — резкоположительная реакция (+ + + ). Реакция исчезает через три-четыре дня.

Регионарное (местное) введение гонококкоковой вакцины для диагностики гонореи было предложено Пуанклю и разработано у нас И. Г. Бурлаковым.

Регионарная реакция доказывает, по Бурлакову, наличие живых возбудителей в области локализации процесса, так как в основе этой реакции лежит резкое усиление окислительных процессов, местный ацидоз, а окислительные процессы возможны только при условии, если деструкции подвергаются живые возбудители. В этом основное отличие регионарной реакции от кожной. Техника регионарной реакции заключается в том, что вводят 0,2 мл гонококковой вакцины (400 млн. микробных тел) в слизистую цервикального канала или в слизистую влагалища. Положительной реакцией считают повышение температуры до 38° ( + ), повышение температуры до 39° — ясно положительной (+ + ) и повышение до 40°-резкоположительной реакцией ( + + + ).

Кроме повышения температуры, реакция сопровождается ознобом, головной болью, иногда рвотой и местными болями (в области пораженных придатков). Реакция наступает через 15-45 минут и продолжается в течение 2-16 часов. Наивысший подъем температуры наблюдается через три-четыре часа после введения вакцины. Положительные результаты регионарной реакции при явной гонорее наблюдаются в 94,6%, при подозреваемой — в 67,7%. Регионарная реакция сочетает в себе элементы провокации, поэтому на следующий день после введения вакцины следует брать повторно мазки для бактериоскопии. Отрицательной стороной регионарного метода являются бурные реакции, поэтому применение этого метода противопоказано в амбулаторной практике и ослабленным больным.

Определение морфологии крови . Влияние токсина гонококков на морфологию крови больных своеобразно; оно касается, главным образом, состава белой крови. Изменения клеток гноя и крови при лечении гонореи были подробно изучены Е. А. Сельковым. Лейкоцитоз при гонорее, по данным ряда авторов, не повышается, оставаясь большей частью в пределах 4000-10 000 лейкоцитов в 1 мм3 крови. Иногда обнаруживается повышенный лейкоцитоз при острой гонореей при асцендировании процесса. В 89% случаев гонореи верхних отделов женской половой системы лейкоцитоз остается в пределах нормы и только в 11% он превышает 10 000. Ограниченность процесса, малая связь с общим крово- и лимфообращением является причиной нормального лейкоцитоза при гонорее. Когда условия всасывания лучше (в послеродовом периоде, при генерализации процесса), отмечается высокий лейкоцитоз. Наиболее значительный лейкоцитоз наблюдается в тех случаях, когда имеется комбинация гонорейных пиосальпинксов с перипараметритами, что можно объяснить смешанной инфекцией. В противоположность гонорейным аднекситам, параметриты, как заболевания, не характерные для гонореи, дают высокие цифры лейкоцитоза (12 000-20 000 и выше).

В гемограмме крови наибольшее практическое значение при гонорее имеют изменения количества лимфоцитов и эозинофилов. Эозинофилию считают характерной особенностью крови гонорейных больных. Ланге наблюдал значительную эозинофилию (15-20%) при гонорейных эндометритах а аднекситах. А. В. Файнштейн, изучая морфологические изменения крови при воспалениях придатков различной этиологии, нашел, что только при гонорейных аднекситах встречается эозинофилия (4,5-12%). Увеличение эозинофилов указывает на защитную реакцию организма, которая наступает, по-видимому, быстрее, чем при других инфекциях. Эозинофилия в крови, как признак аллергического состояния, может наступить и после введения гонококковой вакцины, поэтому исследование крови на лейкоцитарную формулу следует производить до вакцинации, а не наоборот. По Е. А. Селькозу, эозинофилы появляются при местном лечении в выделениях на третьи-пятые сутки и служат признаком неосложненного течения гонореи, они нейтрализуют эндотоксины.

Лимфоцитоз в крови при гонорее (свыше 25%) находили М. А. Теребинская-Попова, Л. Л. Окинчиц, А. И. Петченко и др. В остром периоде и при обострениях гонореи, в особенности при пиосальпинксах или пельвеоперитонитах, ни лимфоцитоза, ни эозинофилии не бывает; наоборот, наблюдается кратковременная лимфопения, снижение числа или исчезновение эозинофилов. С прекращением острых воспалительных явлений лимфопения переходит в лимфоцитоз, увеличивается количество эозинофилов. С этими оговорками можно считать, что лимфоцитоз и эозинофилия являются частыми и характерными спутниками гонореи. Мы находили лимфоцитоз при женской гонорее в 70-73,3%, а эозинофилию — в 45-60% случаев.

Реакция оседания эритроцитов . Значительное ускорение дает острая гонорея верхнего отдела гениталий; уретриты и эндоцервицита даже с обильным гнойным отделяемым не дают заметного ускорения РОЭ. При гонорее придатков чаще наблюдается ускорение реакции; в этих случаях она может помочь диагностике, особенно при сопоставлении с лейкоцитозом. Триада — нормальный лейкоцитоз, ускоренная реакция оседания эритроцитов, положительная реакция на гоновакцину — позволяет ставить предположительный диагноз гонореи R тех случаях, когда гонококки длительное время не обнаруживаются.

Использованные источники: www.blackpantera.ru

ВАС МОЖЕТ ЗАИНТЕРЕСОВАТЬ:

  Определение гонореи по крови

  Осложнённая гонорея

  Венерические заболевания гонорея симптомы

  От гонореи могут не идти месячные

  Гонорея и гарднерелла одно и тоже

  Ошибочный анализ гонореи

Постановка основного опыта РСК Борде-Жангу;

Реакция связывания комплемента Борде-Жангу

Реакция ставится для диагностики хронической гонореи с целью обнаружения антител к гонококку.В РСК участвуют 2 системы: основная система — испытуемая сыворотка, антиген, комплемент и вспомогательная, индикаторная или гемолитическая система — гемолитическая сыворотка и эритроциты барана.

Если в первой системе образуются специфический комплекс антиген + антитело, то комплемент адсорбируется (соединяется с этим комплексом) и гемолиза во второй системе не происходит.Для реакции требуется:

1. Испытуемая сыворотка, которая получается из крови, взятой пункцией локтевой вены больного. После свёртывания крови сыворотка отсасывается в отдельную пробирку и инакти-вируется 30 минут при 56 °С на водяной бане.

2. Антиген — взвесь убитых гонококков.

3. Эритроциты барана получают из стерильно взятой де-фибринированной крови. Их отмывают, центрифугируя 3 раза с новыми порциями физиологического раствора. В реакции используют 3 %-ю взвесь эритроцитов.

4. Гемолитическая сыворотка готовится заранее путём иммунизации кроликов эритроцитами барана. Перед употреблением производится титрование сыворотки.

5. Комплемент — свежая сыворотка морской свинки. Из сердца морской свинки шприцем насасывается кровь, после свёртывания отделяется сыворотка. Перед опытом вытитровы-вается рабочая доза комплемента. Для этого берут основное разведение комплемента 1:10 и разливают его по пробиркам от 0.1 до 0,5, после чего объем в каждой пробирке доводят физиологическим раствором до 1,5 мл.

Одновременно заготавливают гемолитическую систему -разведенная в тройном титре, гемолитическая сыворотка + 3 % взвесь эритроцитов барана. Оба ингредиента в разных объемах и выдерживают в термостате 30 минут (сенсибилизация смеси), после чего смесь добавляют по 1 мл в пробирки и помещают в термостат на 30 минут. Контролем служат 2 пробирки:

1. 1 мл гемолитической системы + 1,5 мл физиологического раствора;

2. 0,5 мл комплемента 1:10 + 0,5 мл взвеси эритроцитов + 1,5 мл физиологического раствора.Титром комплемента называется его минимальное количество, при котором ещё происходит гемолиз. Для постановки реакции берут рабочую дозу комплемента, увеличенную против титра на 20-25 %, т.е., обычно то количество комплемента, которое имеется в предпоследней пробирке с гемолизом. Увеличение дозы комплемента необходимо потому, что в реакции активность комплемента может оказаться несколько подавленной другими ингредиентами реакции (антиген, сыворотка).

Вначале в 2 пробирки разливается инактивированная и разведённая 1:5 испытуемая сыворотка. Затем в 1-ю пробирку приливается антиген, во вторую — физиологический раствор. После этого во все пробирки добавляется рабочая доза комплемента.

После смешивания ингредиентов штатив с пробирками помещается в термостат при 37 °С на 30 минут (горячее связывание). При холодном связывании штатив с пробирками помещается в ледник при температуре — 4 «С на 18 часов. После выдерживания в термостате во все пробирки добавляется гемолитическая система. Реакция ставится в объёме 0,5 мл. Пробирки снова помещают в термостат на 2 часа, после чего производится предварительная регистрация результатов. Пробирки остаются при комнатной температуре, а на следующий день отмечается окончательный результат.Степень интенсивности реакции оценивается в плюсах. Полная задержка гемолиза — четыре плюса (++++), неполная -три и один плюс. Полный гемолиз обозначается минусами (-).

Использованные источники: studopedia.su