Окраска по граму гонорея

Гонококки (Neisseria gonorrhoeae), Микроскопия с окраской по Граму

Микроскопическое исследование окрашенных по Грамму мазков на гонорею (анализ на гонококки) отделяемого мочеполовых органов является быстрым, дешевым и простым методом диагностики гонореи.

Гонорея — одно из древнейших венерических заболеваний (гонорея, триппер), вызывается грамотрицательным диплококком — Neisseria gonorrhoeae. Передаётся половым путем, поражая преимущественно слизистые оболочки мочеполовой системы. Клинические проявления заболевания у мужчин и женщин разнятся. У женщин чаще всего это бессимптомные формы инфекции, и выраженная симптоматика появляется лишь в период развития осложнений. В связи с этим нередко возбудитель у них обнаруживается случайно.

При подозрении на гонококковую инфекцию необходимо проведение микроскопии с окраской по Граму. Гонококк при этом выглядит как внутриклеточный грамотрицательный диплококк. Данный метод обладает меньшей чувствительностью и специфичностью, чем другие методы и зависит от квалификации врача. Этот тест позволяет установить диагноз в большинстве случаев, когда имеются явные клинические проявления. Данный метод предпочтительнее использовать для диагностики гонореи у мужчин, где он дает более точные результаты. Однако такая картина встречается далеко не во всех случаях инфицирования N. gonorrhoeae. Например, у женщин часто отсутствует классическая картина с фагоцитированными гонококками (диагностическая чувствительность метода для женских образцов — 36,2%), а исследование фарингеальных, конъюнктивальных и ректальных проб этим методом неинформативно. Не стоит забывать, что в материале могут присутствовать и другие виды нейссерий, которые фенотипически неотличимы от N. gonorrhoeae.

Использованные источники: clinlabs.com

СТАТЬИ ПО ТЕМЕ:

  Уколы для гонорея

  Гонорея и ее возбудители

  Сифилис гонорея трихомониаз хламидиоз

  Трипак или гонорея

Исследование выделений при гонорее

Техника приготовления препаратов

Материал из уретры, влагалища, шейки матки, прямой кишки помещают на предметное стекло и распределяют сравнительно тонким слоем в виде равномерного сплошного мазка в центре препарата. Стекла обозначают буквамиU(urethra), V(vagina), C(cervix), R(rectum). Обычно на одном предметном стекле делают два мазка на расстоянии друг от друга. Для исследования доставляют в лабораторию 10-15 мл свежевыпущенной утренней порции мочи. Мочу центрифугируют, из осадка, нитей и хлопьев готовят нативные препараты и препараты для бактериоскопического исследования. С целью получения секрета предстательной железы и семенных пузырьков производят массаж простаты и первые капли сока берут на предметное стекло или же доставляют в небольшой порции мочи. При поражении суставов материалом для исследования служит полученный пунктат, в послеродовом периоде исследуют лохи, при заболевании глаз- гнойное отделяемое с конъюнктивы. Приготовленные мазки или собранный материал доставляют в лабораторию с направлением , в котором указывают место взятия материала и предполагаемый диагноз. В ответах из лаборатории нужно отмечать количество форменных элементов, эпителиальных клеток в мазке, присутствие или отсутствие других микроорганизмов ( и их отношение к окраске по Граму), вагинальных трихомонад, дрожжевых клеток. Обнаружение гонококков производят с помощью следующих унифицированных методов.

Мазки должны быть равномерно размазанными, нетолстыми. Гонококки в тонких слоях окрашиваются грамотрицательно или переобесцвечиваются, в толстых — грамположительно. Высушенные на воздухе мазки фиксируют на пламени горелки и окрашивают (один мазок — 1%-ным раствором метиленового синего, второй — по Граму). При окраске по Граму лучше пользоваться водным раствором кристаллического фиолетового и 1%-ным водным раствором нейтрального красного. Мазок, окрашенный метиленовым синим, используется только для предварительного ориентировочного просмотра. Окончательное заключение по результатам микроскопии делается только на основании окраски препарата по Граму. Если не учесть это замечание, то можно допустить ошибку, так как другая флора, помимо гонококка, может располагаться внутриклеточно и иметь внешнее сходство с гонококком.

Окраска мазков по Граму

Реактивы и растворы: 1. 1% водный раствор кристаллического фиолетового. (Краску растворяют в горячей дистиллированной воде, раствор охлаждают и фильтруют через двойной бумажный фильтр). 2. Раствор Люголя (1 г кристаллического йода, 2 г калия йодида, 300 мл дистиллированной воды). 3. 96% этиловый спирт. 4.1% водный раствор нейтрального красного. На высохший и фиксированный на пламени мазок кладут кусочек фильтровальной бумаги по размеру предметного стекла или несколько меньше, наливают раствор кристаллического фиолетового. Через 1-2 мин бумагу с краской снимают, мазок смывают водой и на 0,5-1 мин в зависимости от толщины мазка заливают раствором Люголя. После этого раствор сливают и мазок помещают в ванночку со спиртом для обесцвечивания под визуальным контролем, погружая и вынимая его из спирта до тех пор, пока с него не перестанут стекать струйки краски бледно-серого цвета. Препарат быстро промывают в воде, на 2 мин наливают раствор нейтрального красного, затем опять промывают в воде и высушивают на воздухе. Препарат помещают под микроскоп с иммерсионной системой при плоском зеркале и открытой диафрагме. В мазке, окрашенном по Грамму, на розовом фоне протоплазмы лейкоцитов выделяются гонококки ярко-розового цвета. Кроме того, гонококки могут локализоваться в нейтрофильных гранулоцитах. Часто они располагаются на эпителиальных клетках или под ними.

Окраска метиленовым синим.

Реактивы:1г метиленового синего растворяют в 100мл дистиллированной воды , фильтруют.

На мазки, высушенные на воздухе и фиксированные над пламенем спиртовки или метиловым спиртом, на 15-20 секунд наносится 1%-ный водный раствор метиленового синего, который затем осторожно смывается водой. После высушивания мазки микроскопируются. Цитоплазма форменных элементов окрашивается в бледно- голубой цвет, ядра — в синий, гонококки — в интенсивно- синий. Аналогично окрашиваются и другие кокки. Если они находятся внутри клеток, то напоминают гонококки.

Препарат микроскопируют под иммерсионной системой при плоском зеркале и открытой диафрагме. Гонококки окрашиваются в ярко-розовый цвет, протоплазма лейкоцитов — в слабо-розовый цвет. Ядра лейкоцитов и эпителиальных клеток, поскольку они удерживают частично кристаллвиолет, окрашиваются в слабо-синий цвет. В переобесцвеченном мазке ядра лейкоцитов и эпителиальных клеток почти не имеют фиолетовой окраски. В недообесцвеченном мазке гонококки окрашиваются в фиолетовый цвет и их можно принять за грамположительные кокки. В случае неправильной окраски мазка по Граму берут препарат, окрашенный метиленовым синим, предварительно снимая с него иммерсионное масло спиртом или ксилолом, и окрашивают по Граму.

Рис. 2 Гонорея при микроскопии

Рис. 3 Электронограмма ультратонких срезов гонококка: А) видна наружная мембрана клеточной стенки в бинарное деление гонококка; Б) отделяемое уретры больного, гонококки на эпителиальной клетке.

Рис. 4 Внутри и внеклеточные диплококки

Рис. 5 Гонорея у женщин

Рис. 6 Поражение и шейки матки, с выделение гноя из половых органов

Рис. 7 Гонорейное поражение суставов.

Гонорея у мужчин

Рис. 8 Слизистые выделения Мелкие болезненные узелки

Рис. 9 Слизисто — гнойное выделение

Использованные источники: studbooks.net

ПОХОЖИЕ СТАТЬИ:

  Хорошее средство от гонореи

  Гонорея показать картинки

  Гонорея сифилис лечение

  Бесплодие после гонореи лечение

  Какие анализы гонореи

  Анализ на нейссерия гонореи

Которым окрашивают мазок в течение 1 минуты.

Мазки, окрашенные эозином и метиленовым синим или одним

метиленовым синим, нужно использовать для изучения морфологии и

расположения диплококков, в то время как окончательный

лабораторный диагноз гонореи ставится на основании мазков,

окрашенных по способу Грама. Иначе возможны ошибки, т. к.

стафилококки и стрептококки могут также располагаться

внутриклеточно и напоминать собою гонококки. Форма, расположение и

окраска диплококков по способу Грама дают возможность различать их

Однако при идентификации гонококков способ Грама является

ценным только в том случае, если им правильно пользоваться, т. к.

неправильная окраска не только затрудняет диагностику, но и

приводит к большому числу ошибок. При правильной окраске по

способу Грама ядра клеточных элементов (лейкоцитов, эпителиальных

клеток) должны частично удерживать основную фиолетовую краску

(критерий правильности окраски), т.е. в центре они должны быть

окрашены в фиолетовый цвет, а по периферии в оранжево-красный, а

гонококки, расположенные в лейкоцитах и на эпителиальных клетках,

обесцвеченные таким образом и окрашенные дополнительной краской,

будут оранжево-красные. Высокое качество окраски обеспечивается

своевременным прекращением обесцвечивания мазков. При

недообесцвечивании мазков, когда в фиолетовый цвет интенсивно

окрашены ядра клеток, гонококки часто сохраняют фиолетовую окраску

и могут быть приняты за другие микроорганизмы. В переобесцвеченных

мазках стафилококки и стрептококки могут быть окрашены как и ядра

клеток в оранжево-красный цвет и приняты за гонококки.

При производстве бактериоскопического исследования

врач-лаборант должен оценивать правильность окраски мазков по

способу Грама и диагностировать гонорею только по правильно

окрашенным участкам мазка. Качество окраски мазков в значительной

степени зависит и от их приготовления: материал в мазках из

уретры, цервикального канала и ректум на одном стекле должен быть

расположен равномерным, тонким слоем, но в то же время содержать

достаточно материала для исследования.

При неудачной окраске по способу Грама другой мазок,

окрашенный метиленовым синим или бриллиантовым зеленым, после его

исследования нужно перекрасить по способу Грама. Для этого

фильтровальной бумагой с него снимают иммерсионное масло,

несколько раз погружают в 96ё этиловый спирт для полного удаления

масла, а затем красят как неокрашенный.

Если мазок недообесцвечен, его повторно обесцвечивают и

докрашивают нейтральным красным как описано ранее.

Врач-лаборант, исследующий мазки, указывает количество

форменных элементов и слизи, пользуясь следующими обозначениями:

большое, умеренное, незначительное, скудное количество, единичные

клетки; количество лейкоцитов можно обозначать цифрами (0-3, 5-10,

15-20 и т.д., покрывают все поле зрения): гонококки — обнаружены,

не обнаружены. Кроме наличия или отсутствия гонококков следует

отмечать и другую бактериальную флору, указывая ее отношение к

окраске по способу Грама. Там, где это возможно, на основании

морфологических особенностей микроорганизмов, надо давать более

точное определение обнаруженных микроорганизмов: стрептококки,

стафилококки, вагинальная, ложнодифтерийная палочки и т.п.

Необходимо также обращать внимание на присутствие в мазках

влагалищной трихомонады и грибов рода кандида.

Идентификация гонококка производится на основании его свойств:

морфологии, расположения и отношения к окраске по способу Грама.

Гонококк — это парный кокк, имеющий форму кофейного зерна;

кокки обращены друг к другу своей вогнутой стороной. Размножаясь

делением в разных плоскостях, гонококки не образуют цепочек.

Внутри лейкоцитов они располагаются парами или группами так, что

одни диплококки лежат по отношению к другим под различными углами.

Внеклеточное расположение гонококков также имеет свои характерные

особенности. Часто гонококки лежат на клетках плоского эпителия в

большом количестве рядами с расположением диплококков под углом

или перпендикулярно друг к другу внутри ряда. Частота внутри- и

внеклеточного расположения гонококков зависит как от периода

заболевания, так и от методики взятия материала.

Основным дифференциальным признаком является отношение

гонококка к окраске по способу Грама. Гонококки грамотрицательны,

т.е. они легко обесцвечиваются спиртом и окрашиваются

Положительный ответ на гонококки можно давать только на

основании выявления типичных форм их в мазках, окрашенных

метиленовым синим (бриллиантовым зеленым) и по Граму.

Нередко в мазках можно обнаружить гонококки, измененные

морфологически и тинкториально. Однако при некоторой настойчивости

обычно можно найти единичные группы гонококков, хорошо сохранившие

свои основные свойства. Лишь в тех случаях, когда это не удается и

встречаются не вполне типичные, сходные с гонококками диплококки,

или внеклеточные грамотрицательные диплококки, следует давать

описательный ответ, рекомендуя повторное взятие материала и

При свежей остро протекающей гонорее правильно проведенное

бактериоскопическое исследование обычно достаточно для

окончательного заключения. При хронической и свежей торпидно

текущей гонорее бактериоскопический метод также нередко позволяет

обнаружить гонококки, в противном случае прибегают к повторным

исследованиям или к бактериологическому методу.

Бактериологический метод исследования

Способы забора материала для бактериологического

Организационно забор материала для бактериологического

исследования при диагностике гонореи может производиться четырьмя

1. Забор материала непосредственно в бактериологической

лаборатории, где предусматриваются помещения для больных, их

регистрации и взятия у них патологического материала, а также

необходимое оборудование и инструментарий (гинекологические

кресла, зеркала, ложки Фолькмана, ушные ложки, гинекологические

пинцеты и др.). Данный способ является оптимальным. Взятие

материала производит специально обученный средний медицинский

2. Забор материала в кабинете врача, принимающего больного. В

этом случае в кабинете необходимо иметь термостат, поддерживающий

температуру 36,0-36,5ё и эксикатор. Взятие материала и посев его

на предварительно прогретую в термостате питательную среду

производит лечащий врач, который в последующем все засеянные

питательные среды помещает в эксикатор, а последний в термостат. В

эксикаторе создают повышенное содержание CO2. Питательные среды с

посевным материалом выдерживают в термостате 24 часа, а затем

доставляют в бактериологическую лабораторию для изучения и

исследования, по возможности создав при этом термостатные условия,

особенно в холодное время года. Данный способ приемлем.

3. Забор материала и посев его на питательную среду

непосредственно в кабинете лечащего врача и последующая доставка

его в бактериологическую лабораторию в ближайшие часы в специально

переносном термостате. Взятие материала и посев производит врач,

принимающий больного, он же контролирует доставку посевного

материала в лабораторию. Посевной материал должен быть доставлен в

лабораторию не позже 6 часов с момента посева. Данный способ

возможен, но не желательный.

4. Забор материала непосредственно в кабинете лечащего врача в

среду сохранения (транспортировки). Материал забирает врач,

принимающий больного, специально подготовленным для этого

стерильным тампоном, помещает последний в стерильную пробирку со

средой сохранения, закрывает резиновым колпачком и помещает в

холодильник при 4ё для хранения до окончания забора материала у

больных, которым планировалось в этот день бактериологическое

исследование, после чего посевной материал отправляется в

бактериологическую лабораторию не позже 24 часов с момента взятия

материала. Данный способ можно применять при пересылке материала с

Посев от каждого больного должен сопровождаться одновременно

приготовлением двух мазков из того же очага, откуда сделан посев.

Показания к бактериологическому исследованию

Бактериологическое исследование для диагностики гонореи должно

проводиться: 1) у всех мужчин, женщин и детей, обращающихся к

врачам по поводу воспалительных заболеваний мочеполовых органов, а

также у всех половых контактов или предполагаемых источников

заражения гонореей, у которых при микроскопическом исследовании

мазков до и после провокаций гонококки не обнаружены (не менее 4

мазков), но имеются клинические, анамнестические или

эпидемиологические подозрения на гонорею; 2) у детей для

подтверждения гонорейного заболевания, при обнаружении гонококков

бактериоскопическим методом исследования (посев, выделение чистой

культуры, определение ее ферментативных свойств); 3) у больных

гонореей после окончания лечения (не ранее чем через 8-10 дней) и

при снятии их с учета; 4) у больных трихомониазом и другими

негонококковыми заболеваниями после проведенного лечения (при

наличии показаний); 5) у больных, у которых при

бактериоскопическом исследовании обнаружены измененные

микроорганизмы, подозрительные на гонококки; 6) при необходимости

определения чувствительности гонококка к антибиотикам, его

сахаролитических свойств или продуцирования им беталактамазы; 7)

по требованию следственных органов и судебной экспертизы.

Мазки из патологического материала и культур, в которых

обнаружены гонококки, должны сохраняться в лаборатории в течение

Использованные источники: infopedia.su

СТАТЬИ ПО ТЕМЕ:

  Почему лечение гонореи

  Гонорея и хлоргексидин

  Моча кровь гонорея

  Амоксициллин от гонореи инструкция

  У кого гонорея прошла сама

Лабораторная диагностика гонореи

Также можно записаться на удобное для Вас время.

Лабораторная диагностика гонореи

Диагностика гонореи основывается на данных анамнеза, клиниче­ской картины, обнаружении возбудителя.
Решающее значение имеют лабораторные методы исследования. При подозрении на наличие го­нококковой
инфекции наряду с общепринятыми данными исследуют отделяемое мочеиспускательного канала, парауретральных
протоков, секрет предстательной железы, семенных пузырьков, желез и лакун мочеиспускательного канала,
промывные воды прямой кишки. По по­казаниям исследованию подвергаются соскобы и мазки конъюнктивы глаз,
других слизистых оболочек, синовиальной оболочки, синовиальной жидкости и др. В клинической практике для
диагностики гонореи чаще применяют бактериоскопические и бактериологические методы. Для идентификации
гонококков используют также реакции иммунофлюоресценции и коагапотинации с моно- и поликлональными
анти­телами, иммуноферментный анализ и др. Наиболее результативные методы молекулярной биологии:
полимеразная цепная реакция, ДНК-ДНК-зондовая гибридизация. Серологические методы малоинформа­тивны и
имеют ограниченное применение.

Бактериоскопическое исследование

Наиболее распространенный метод. Гонококки хорошо окраши­ваются всеми основными анилиновыми
красителями. Чаще всего используют 1 % раствор эозина в 60—70° спирте и 1 % водный раствор метиленового
синего или окрашивают мазки по Граму.

•При окраске метиленовым синим интенсивно окрашенные го­нококки особенно хорошо видны на бледном
фоне лейкоцитов и эпителиальных клеток, протоплазма которых бледно-голубо­го цвета, ядро — синего
цвета. Эта окраска имеет лишь ориен­тировочное значение при микроскопической диагностике го­нореи,
поскольку все кокки окрашиваются в синий цвет.

•Окраска мазков по Граму: метод основан на свойстве клеточ­ной оболочки гонококка обесцвечиваться
спиртом. Кокки, не относящиеся к роду Нейссерий, остаются окрашенными. Го­нококки в мазке, окрашенном по
Граму, яркорозового цвета и выделяются на бледно-розовом фоне протоплазмы лейкоци­тов. При остро
протекающем процессе большое количество го­нококков находится в лейкоцитах. В более поздних
(хроничес­ких) стадиях болезни отделяемое становится скудным и в нем содержится меньше лейкоцитов,
гонококки нередко обнару­живаются с трудом. Они могут находиться внутри эпителиаль­ных клеток и
простейших (трихомонад), сохраняя свою жизне­деятельность.

Бактериологическое исследование

Бактериологический метод в 2—3 раза повышает число выявляе­мых больных гонореей. Решающим при этом
виде диагностики яв­ляется качество питательных сред. Колонии гонококка вырастают в течение 1—2 сут.
Все колонии гонококка имеют круглые очертания, ровные края, блестящую поверхность; они прозрачные,
бесцветные, слизистого характера.

Использованные источники: www.vahaklinika.ru

СМОТРИТЕ ЕЩЕ:

  В какие сроки проявляется гонорея

  Клиника гонореи

  Какие уколы для лечения гонореи

  Лечение и последствия гонореи

  Какие надо сдавать анализы на гонорею

  Какой надо сдавать анализ на гонорею

Гонококки (Neisseria gonorrhoeae), Микроскопия с окраской по Граму

Микроскопическое исследование окрашенных по Грамму мазков на гонорею (анализ на гонококки) отделяемого мочеполовых органов является быстрым, дешевым и простым методом диагностики гонореи.

Гонорея — одно из древнейших венерических заболеваний (гонорея, триппер), вызывается грамотрицательным диплококком — Neisseria gonorrhoeae. Передаётся половым путем, поражая преимущественно слизистые оболочки мочеполовой системы. Клинические проявления заболевания у мужчин и женщин разнятся. У женщин чаще всего это бессимптомные формы инфекции, и выраженная симптоматика появляется лишь в период развития осложнений. В связи с этим нередко возбудитель у них обнаруживается случайно.

При подозрении на гонококковую инфекцию необходимо проведение микроскопии с окраской по Граму. Гонококк при этом выглядит как внутриклеточный грамотрицательный диплококк. Данный метод обладает меньшей чувствительностью и специфичностью, чем другие методы и зависит от квалификации врача. Этот тест позволяет установить диагноз в большинстве случаев, когда имеются явные клинические проявления. Данный метод предпочтительнее использовать для диагностики гонореи у мужчин, где он дает более точные результаты. Однако такая картина встречается далеко не во всех случаях инфицирования N. gonorrhoeae. Например, у женщин часто отсутствует классическая картина с фагоцитированными гонококками (диагностическая чувствительность метода для женских образцов — 36,2%), а исследование фарингеальных, конъюнктивальных и ректальных проб этим методом неинформативно. Не стоит забывать, что в материале могут присутствовать и другие виды нейссерий, которые фенотипически неотличимы от N. gonorrhoeae.

Использованные источники: clinlabs.com